Conţinut
Compușii chimici bromura de cetiltrimetilamoniu, bromura de hexadeciltrimetilamoniu, bromura de palmitri trimetilamoniu și bromura de cetrimoniu sunt toate cunoscute și de CTAB. Substanța chimică este utilizată ca un întreținător al pH-ului în genomul secvențial ADN, în special plantele.
Formula CTAB
Cantitățile formulelor diferitelor substanțe chimice CTAB diferă în funcție de laborator. Totuși, toate ingredientele includ Tris HCI 1 M pH 8,0, EDTA 0,5 M, NaCI 5 M și H20 (uneori de două ori distilat). Pentru componenta CTAB, unele laboratoare utilizează bromură de cetiltrimetilamoniu și altele bromură de hexadeciltrimetilamoniu.
Prepararea țesuturilor vegetale
Prepararea țesutului vegetal poate varia, în funcție de material. Pereții și membranele celulare trebuie rupte pentru a avea acces la materialele nucleare fără nici o degradare. În mod normal, în procesul de măcinare, materialul vegetal cu azot lichid permite accesul la ADN, păstrând enzime celulare dăunătoare și produse chimice inactive.
Suspensie și centrifugare
Țesutul zdrobit este așezat pe lama CTAB și introdus într-un castron cu apă curgătoare. Se amestecă apoi cu cloroform și se centrifughează pentru a separa proteinele solubile și alte materiale. ADN-ul este apoi precipitat din faza apoasă și spălat cu grijă pentru a îndepărta sărurile contaminante. ADN-ul purificat este apoi retras și depozitat pe un tobogan TE sau apă distilată sterilă.