Conţinut
- Dezavantaje ale tehnicii de citometrie în flux
- Debit scăzut al celulei
- Nevoia de operatori cu înaltă calificare
- Citometrele de debit sunt scumpe
Citometria de flux, o tehnică care poate ajuta la caracterizarea particulelor microscopice, cum ar fi celulele și cromozomii, permite analiza simultană a caracteristicilor fizice și chimice ale mii de particule pe secundă și pe mai mulți parametri științifici. Separarea celulelor prin fluorescență, care este o formă specializată de citometrie în flux, poate separa, de asemenea, un amestec eterogen de celule în două sau mai multe tulpini, în funcție de proprietățile lor de reflecție a luminii fluorescente. Instrumentele bazate pe acest concept sunt un aparat științific extrem de puternic utilizat în laboratoarele de cercetare și microbiologie pentru separarea fizică a celulelor. Această tehnică este utilă și în diagnosticarea unor boli precum leucemia (cancer de sânge).
Dezavantaje ale tehnicii de citometrie în flux
Cu toate acestea, există unele limitări severe în utilizarea acestei tehnici științifice. Deoarece rezultatele citometriei în flux sunt analizate la nivel agregat, nu este ușor să observăm și să măsurăm comportamentul celulei individuale. În plus, deoarece această tehnică necesită trecerea celulelor printr-un curent de lichid, restrânge analiza doar la soluții de celule suspendate. Din același motiv, celulele țesuturilor trebuie să fie dezagregate din țesut, ceea ce se face prin tratarea țesuturilor intacte cu o enzimă care evidențiază aceste celule pentru o analiză ulterioară.
Debit scăzut al celulei
Unul dintre cele mai mari dezavantaje ale citometrelor de flux este debitul celular scăzut al acestora. Chiar și pentru separatoarele de mare viteză, rata este mai mică de câteva mii de celule pe secundă. Totuși, multe experimente necesită un număr mare de celule. Deci, chiar și separatoarele de mare viteză trebuie să funcționeze mult timp, ceea ce nu numai că este scump, dar poate provoca și probleme de calitate, deoarece aceste celule trecute prin procese foarte lungi nu mai pot fi utilizate în experimente. Această problemă poate fi agravată atunci când celulele separate trebuie să se afle într-un mediu steril. Deși citometrele cu flux de mare viteză pot furniza celule sterile, acest lucru face procesul mai complex și reduce fluxul.
Nevoia de operatori cu înaltă calificare
Deoarece citometrul de flux este un dispozitiv foarte sofisticat, numai personalul calificat și cu înaltă pregătire îl poate utiliza și poate atinge niveluri acceptabile de utilizare cu echipamentul.
Citometrele de debit sunt scumpe
Citometrele de flux sunt instrumente scumpe de cumpărat și întreținut. Un citometru cu flux laser, care poate analiza doar fără separare, costă aproape R $ 200.000, în timp ce un citometru pe bază de lampă costă puțin mai puțin, în jur de R $ 150.000. Citometrele de flux cu capacitatea adăugată de a separa celulele pot costa aproape de două ori mai mult decât versiunile lor mai ieftine. În plus, efectuarea unei separări de mare viteză este o altă cheltuială recurentă, care costă în mod normal mii de reali pentru fiecare utilizare.