Cum se calculează UFC din diluții

Autor: Annie Hansen
Data Creației: 27 Aprilie 2021
Data Actualizării: 13 Mai 2024
Anonim
How to Calculate CFU per ml of Bacterial Sample? in 3 Steps || cfu/ml in Microbiology
Video: How to Calculate CFU per ml of Bacterial Sample? in 3 Steps || cfu/ml in Microbiology

Conţinut

UFC înseamnă Colony Forming Units, un termen folosit în microbiologie pentru a cuantifica numărul de bacterii prezente într-o soluție. În funcție de concentrația probei, va fi necesar să se efectueze diluții multiple și să se plaseze probele în cutii Petri. Dacă există multe colonii de bacterii, numărarea va fi dificilă și, dacă sunt puține, eșantionul poate să nu fie reprezentativ. În general, este o idee bună să plasați probe din soluția originală pe plăci, o diluție 1/10 (1 parte soluție și 9 părți soluție salină), o diluție 1/100 și o diluție 1/1000.

Calculați CFU din diluțiile bacteriene

Pasul 1

Efectuați un număr preliminar al fiecărei plăci după timpul de incubare a bacteriilor, de obicei o zi sau două. Ar trebui să numărați doar colonii individuale, care ar trebui să fie puncte separate izolate, nu seturi de colonii care au crescut împreună. Alegeți placa care are mai mult de 30 și mai puțin de 300 de colonii.


Pasul 2

Numărați numărul de colonii individuale. Acesta este numărul UFC al diluției dvs. - trebuie să efectuați un calcul simplu pentru a determina UFC din eșantionul original. Pentru acest exemplu, va fi utilizată o placă ipotetică care conține 46 de colonii.

Pasul 3

Determinați dimensiunea diluției pe care ați folosit-o. În mod ideal, ar trebui să etichetați vasele Petri la începutul experimentului. Pentru acest exemplu, este posibil să fi amestecat 1 ml de cultură bacteriană cu 99 ml de soluție salină. Aceasta formează o diluție 1/100.

Pasul 4

Înmulțiți gradul de diluare cu cantitatea pe care ați pus-o pe farfurie. Dacă în acest exemplu puneți 0,1 ml de diluție 1/100 pe agar, trebuie să înmulțiți 0,1 x 1/100 pentru un rezultat de 1/1000 sau 0,001.

Pasul 5

Împărțiți numărul UFC al diluției (numărul de colonii pe care le-ați numărat) la rezultatul obținut la pasul 4. Pentru acest exemplu, ați împărți 46 la 1/1000, care este același cu înmulțirea cu 1000. Rezultatul este 46000 UFC în eșantion original.