Conţinut
Cromatografia este utilizată pe scară largă în laboratoarele chimice pentru a determina identitatea unei componente necunoscute. Această componentă curge prin materialul de înfășurare a coloanei și interacționează cu particulele. Interacțiunile dintre particule și componentele din probă se bazează pe atracția sau solubilitatea dintre ele. Moleculelor care nu au nicio interacțiune cu particulele din materialul învelișului li se permite să treacă prin el fără obstacole. Timpul necesar pentru ca moleculele să treacă de la punctul de injecție la sistem la vârful maxim al unei molecule non-reactive este timpul mort al coloanei.
Pasul 1
Consolidați proba necunoscută cu o cantitate mică dintr-un compus care nu este reținut de materialul coloanei. Compusul va trece prin coloană fără a interacționa cu materialul de ambalare din coloană.
Pasul 2
Încărcați seringa cu aproximativ 20 microlitri de probă și introduceți acul seringii în orificiul de injecție. Încărcați bucla de probă din supapă golind seringa în supapă.
Pasul 3
Porniți instrumentul de cromatografie și porniți faza mobilă. Această fază curge prin instrument și preia proba prin coloană și detectorul care se termină într-un recipient pentru deșeuri.
Pasul 4
Activați supapa, care permite eșantionului să pătrundă pe traseul de curgere a fluidului. Aceasta încarcă componentele eșantionului în partea de sus a coloanei și începe separarea.
Pasul 5
Monitorizați semnalul emițătorului detectorului și identificați primul vârf din cromatograf. Diferența dintre timpul de injecție și maximul primului vârf, reprezentat de componenta de armare, este timpul mort.
Pasul 6
Măsurați distanța dintre punctul de injecție și înălțimea maximă a primului vârf. Înmulțiți distanța cu viteza hârtiei sau axa pentru a găsi timpul mort.