Conţinut
- Pregătirea extractului de cartof
- Pasul 1
- Pasul 2
- Pasul 3
- Pregătirea amestecului
- Pasul 1
- Pasul 2
- Pasul 3
- Pasul 4
- Sterilizare
- Pasul 1
- Pasul 2
- Pasul 3
- Pasul 4
- Pasul 5
- Turnarea amestecului
- Pasul 1
- Pasul 2
- Pasul 3
- Pasul 4
- Pasul 5
Agarul cu dextroză din cartofi (BDA) este un bun mediu semi-solid de uz general folosit pentru a crea ciuperci. De asemenea, este adesea folosit pentru a izola, crește și menține speciile de ciuperci în creștere. Pot fi achiziționate farfurii Petri gata preparate sau tuburi care conțin BDA, sau BDA se poate face rapid folosind un premix comercial. Cu toate acestea, nu este dificil să faci o versiune simplă și eficientă la un cost redus.
Pregătirea extractului de cartof
Pasul 1
Așezați cartofii într-o oală cu aproximativ 1,2 litri de apă de la robinet și fierbeți pe aragaz timp de o oră.
Pasul 2
Scoateți tigaia de pe foc și lăsați lichidul să se răcească până când poate fi manipulat confortabil (aproximativ zece minute).
Pasul 3
Se toarnă extractul de cartof lichid printr-un filtru sau tifon și se colectează într-un alt recipient.
Pregătirea amestecului
Pasul 1
Adăugați dextroză și agar la un litru de apă din extractul de cartofi.
Pasul 2
Testați pH-ul soluției cu hârtie tester de pH sau pH-metru.
Pasul 3
Dacă pH-ul este peste 6,5, reduceți-l adăugând o picătură de soluție de acid clorhidric la un moment dat și retestând.
Pasul 4
Dacă pH-ul este sub 6, reglați-l adăugând o picătură de soluție de hidroxid de sodiu la un moment dat și retestând.
Sterilizare
Pasul 1
Se amestecă bine și se împarte în loturi mai mici de 250 de mililitri. Se toarnă în patru sticle de 500 ml (fiecare sticlă trebuie să fie pe jumătate plină pentru a evita fierberea).
Pasul 2
Acoperiți fiecare flacon cu o bucată de hârtie din aluminiu pliată, astfel încât filmul să nu cadă, dar, de asemenea, să nu facă o sigilare completă.
Pasul 3
Așezați flacoanele într-o oală sub presiune.
Pasul 4
Utilizați oala sub presiune conform instrucțiunilor producătorului pentru a steriliza BDA la 121 ° C la o presiune de 103,421 Pa (15 psi) timp de 15 minute.
Pasul 5
Opriți oala sub presiune și lăsați-o să revină la presiunea atmosferică, apoi scoateți flacoanele și lăsați-le să se răcească până când pot fi manipulate.
Turnarea amestecului
Pasul 1
Aliniați vasele Petri pe o suprafață plană.
Pasul 2
Odată ce flacoanele au fost răcite la temperatura de manipulare, dar înainte ca mediul să înceapă să se solidifice, țineți flaconul într-o mână și îndepărtați capacul foliei cu cealaltă mână.
Pasul 3
Pentru fiecare cutie Petri, scoateți capacul cu o mână, umpleți-l rapid la jumătate cu BDA lichid și înlocuiți capacul.
Pasul 4
Repetați pasul 3 de mai sus până când toate vasele Petri sunt umplute.
Pasul 5
Dacă a mai rămas ADF, recuperați flaconul cu capacul original pentru frunze, lăsați-l să se răcească și să se solidifice, strângeți capacul din aluminiu și păstrați-l la frigider.